Favipiravir Corona Virüsüne Çare Olacak

Çinli bilim adamları, Japonya tarafından geliştirilen grip ilacı olarak adlandırılan Favipiravir ‘in corona virüs tedavisinde etkili olduğunu üzerine klinik çalışmalarla T-705, Avigan veya favilavir olarak da bilinen Favipiravir, Japonya’nın Toyama Chemical tarafından birçok RNA virüsüne karşı aktivite ile geliştirilen bir antiviral ilaç olduğu iddiasını ortaya attı. Şubat 2020’de Favipiravir Çin’de ortaya çıkan COVID-19 hastalığının deneysel tedavisi için incelenmeye başladı ve şuan bir çok kişide etki gösterdiğini ve vakaların çoğu üzerinde hala denenmekte olduğu iddiasını ortaya attı.

Favipiravir Nedir? Etkileşimi ve Yapısı Nedir?

Favipiravir (T-705; 6-floro-3-hidroksi-2-pirazinkarboksamid), RNA virüslerinin RNA’ya bağlı RNA polimerazını (RdRp) seçici ve güçlü bir şekilde inhibe eden bir anti-viral ajandır. Favipiravir, Toyama Chemical Co., Ltd. tarafından influenza virüsüne karşı anti-viral aktivite için kimyasal kütüphanenin taranmasıyla keşfedildi. RdRp tarafından bir substrat olarak tanınır ve RNA polimeraz aktivitesini inhibe eder. RdRp’nin katalitik alanı, çeşitli RNA virüsleri türleri arasında korunduğundan, bu etki mekanizması, daha geniş bir favipiravir aktivitesi anti-viral aktivitesinin temelini oluşturmaktadır. Favipiravir, influenza virüslerinin çok çeşitli tiplerine ve alt tiplerine karşı etkilidir, mevcut anti-influenza ilaçlarına dirençli suşlar dahil. Favipiravirin, hepsi ölümcül hemorajik ateşe neden olduğu bilinen, arenavirüsler, bunyavirüsler ve filovirüsler gibi diğer RNA virüslerine karşı anti-viral aktiviteler gösterdiğidir. Bu eşsiz anti-viral profiller, favipiraviri spesifik olarak tedavi edilemez RNA viral enfeksiyonları için potansiyel olarak umut verici bir ilaç haline getirecektir.

Favipirin Kimyasalı
Favipirin Kimyasalı

Bu derlemede, çok çeşitli RNA virüslerinin hayvan enfeksiyon modellerinde favipiravir’in etki mekanizmalarını, in vitro geniş bir anti-viral aktivite spektrumu ve terapötik potansiyelini açıklayacağız.

Antibiyotikler, aşılar ve diğer anti-mikrobiyal ajanların ortaya çıkmasıyla 20. yüzyılın ortalarından bu yana anti-enfeksiyon terapilerinde önemli ilerlemeler kaydedilmiştir. Anti-viral tedavinin ana dayanağı, önleyici aşılar ve terapötik anti-viral ajanlar olmuştur, ancak bunlar belirli bir virüs türü için etkilidir. Etkili ilaç veya aşı tedavilerinin mevcut olmadığı, hala ortaya çıkan veya yeniden ortaya çıkan viral enfeksiyonlar vardır. Mevcut anti-viral ilaçlara direnç ciddi bir sorun haline gelmiştir.

Grip, grip virüsü ve dünyada salgın hastalığının neden olduğu en yaygın enfeksiyonlardan biridir. 1997’de Hong Kong’da insanlarda yüksek oranda patojenik kuş gribi virüsü A (H5N1) tanımlanmış ve sürekli salgınlara neden olmaktadır.

Kuş gribi A (H7N9 2013 yılında Çin,)  ve 2009 yılında 17.700 ölüme neden 2009 yılında pandemik influenza A (H1N1), halk sağlığı endişe vardır.

2008 ila 2009 sezon nöraminidaz (NA) inhibitörü olan oseltamivire dirençli A (H1N1) influenza virüsünün salgını ve bir M2 protein inhibitörü olan amantadin, uygulamadan sonra yüksek bir direnç oranı gösterdi.

Halihazırda mevcut olan anti-influenza ajanlarının etki mekanizmasının sınırlı çeşitliliği nedeniyle, yeni bir etki mekanizmasına sahip bir anti-influenza ilacı keşfetmeye güçlü bir ihtiyaç vardır.

Son zamanlarda, eklembacaklı veya vahşi hayvanların aracılık ettiği virüsler dünyada yayılmaktadır. 2014 yılında Batı Afrika’daki Ebola ve Lassa virüslerinin salgınları, ortaya çıkmaları durumunda önleme ve tedavi konusunda sosyal bir endişe yarattı.

Bu virüsler oldukça patojeniktir ve ölümcül enfeksiyonlara neden olur.

Favipiravir (Şek. ) ilk ile taranmıştır bir pirazin analog kimyasal modifikasyonu ile tespit edilmiştir , in vitro hücrelerde, anti-influenza virüs aktivitesi.

Favipiravir, influenza viral RNA polimerazının seçici ve güçlü bir inhibitörüdür,  ve pazarlanan nöraminidaza ve M2 inhibitörlerine duyarlı veya dirençli olanlar da dahil olmak üzere tüm influenza virüs suşlarına karşı etkilidir.

Favipiravir diğer RNA virüslerine karşı anti-viral aktiviteler gösterdi.

Bu veriler, favipiravirin sadece influenza virüsü değil, aynı zamanda çok çeşitli RNA virüsleri tarafından enfeksiyonların tedavisi için umut verici bir ilaç olduğunu açıkça göstermektedir.

Öte yandan, favipiravir teratojenisite ve embriyotoksisite riski taşır.

Bu nedenle, Sağlık, Çalışma ve Refah Bakanlığı, üretimi ve klinik kullanımı için sıkı düzenlemelerle şartlı pazarlama onayı verdi.

Favipiravir Corono Tedavisi
Favipiravir Corono Tedavisi

Favipiravirin etki mekanizmaları

Favipiravir, bir viral proliferasyon döngüsünün ortasında en çok ortaya çıkan viral genomun, ilaç zamanı ekleme testinde çoğalmasını inhibe etti.  Favipiravirin anti-viral aktivitesi, purin nükleosidleri veya pürin bazlarının varlığında zayıflatılmıştır; bu, favipiravirin pirimidin nükleosidleri yerine purin nükleosidleri ile rekabetini gösterir.

Madin Darby Köpek Böbrek (MDCK) hücreleri , influenza virüsünün in vitro deneyi olarak iyi kullanılır . MDCK hücreleri favipiravir ile muamele edildi ve hücresel metabolitler HPLC ile analiz edildi. Favipiravir ribofuranosil-5p-trifosfat (favipiravir-RTP), favipiravir ribofuranoz (favipiravir-R) ve favipiravir ribofuranosil-5p-monofosfat (favipiravir-RMP) tespit edildi. Bu sonuçlar, favipiravirin aktivasyonunun hücrelere dahil edildikten sonra gerçekleştiğini göstermektedir. Favipiravir-RTP kimyasal olarak sentezlendi ve 32 P-GTPdahil edilerek değerlendirilen influenza virüsünün RNA polimeraz aktivitesinin inhibisyonu için test edildi.

Favipiravir-RTP, viral RNA polimeraz aktivitesini nanomolar ila mikromolar arasında değişen konsantrasyonlarda inhibe etti.  favipiravir hiçbiri ve favipiravir-RMP (100 umol / L (Şek. En RdRp) grip RNA-bağımlı RNA polimeraz etkilenen. Bu sonuçlar, favipiravirin anti-viral aktivitesini bir ön ilaç olarak uyguladığını gösterir, çünkü favipiravir, viral RNA polimeraz ile etkileşerek viral replikasyonu inhibe eden aktif bir form olan favipiravir-RTP olarak hücresel olarak fosforibosile edilir.

Favipiravir Kimyasalı
Favipiravir Kimyasalı

Favipiravir-RTP’nin RdRp molekülü ile etkileşiminin mekanizması tam olarak aydınlatılamamıştır. Favipiravirin yeni doğmakta olan bir viral RNA’da yanlış birleştirilebileceği veya korunmuş polimeraz bölgelerine bağlanarak, viral RNA replikasyonu ve transkripsiyonu için nükleotitlerin dahil edilmesini engelleyerek hareket edebileceği varsayılmaktadır. Yakın zamanda, influipiravir’in influenza virüsü enfeksiyonu sırasında ölümcül mutajenezin indüklediği ve düşük (0.0001 PFU / hücre) veya yüksek (10 PFU / hücre) enfeksiyonun in vitro oranında azaldığı gösterilmiştir.. Çeşitli nükleoprotein (NP) klonlarının sekans analizi, saptanmış G → A ve C → T veya C → U geçiş mutasyonlarının sayısında, artan mutasyon sıklığı ve NP geninin nükleotit profillerinde eşlik eden bir kayma olduğunu ortaya koydu çeşitli klonlardan analiz edilmiştir. 11 , 13 ) Bu çalışmalarda yaşayabilir favipiravir dirençli mutantların izole edilmediğine dikkat etmek önemlidir. 9 , 11 – 14 ) Önceki çalışmalar, favipiravirin viripidal etkileri olduğunu, favipiravir ile mutajenezin çeşitli RNA virüsleri ile etkileşebileceğini düşündürmektedir.

RdRp ve şablon viral RNA’lar için kaynak olarak influenza H1N1 ekstraktlarını kullanarak bir primer uzatma deneyi üstlendik. Kap kapma ve transkripsiyon yapılan deney karışımına 5’Cap1 RNA eklenmesi gerçekleşir. Favipiravir-RTP, tek bir molekül varlığında favipiravir-RTP Yeni oluşan RNA dahil edilmiş, ve kordon uzatma bloke edilmiştir (Şek. (Şekil 33 ). 15 ) Jin ve ark. 16 )panhandle yapısını oluşturmak için tasarlanmış sentetik RNA şablonları ve RdRp olarak rekombinant PA / PB1 / PB2 kompleksini kullandı. Favipiravir-RTP’nin yeni doğmakta olan bir RNA şeridine etkili bir şekilde dahil edildiğini, tekli favipiravir-RTP molekülünün dahil edilmesinin, RNA şeridinin genişlemesini kısmen önlediğini ve favipiravir-RTP moleküllerinin çift eklemesinin, ilave uzatmayı tamamen engellediğini gösterdiler. Bu iki çalışma, favipiravir-RTP’nin, bir kez bir viral RNA şeridine dahil edilen viral RNA dizisinin uzantısını etkili bir şekilde inhibe ettiğini göstermektedir.

Resim, resim vb. İçeren harici bir dosya. Nesne adı pjab-93-449-g003.jpg

Figür 3.

Olgunlaşmamış bir RNA sarmalının içine favipiravir-RTP ve GTP dahil edilmesi ve influenza virüs RdRp inhibisyonu (Sangawa dayanarak ve ark. 2013 15 ) ). (A) G11 + 2 pozisyonunda favipiravir-RTP ve GTP’nin dahil edilmesi. 32 P-etiketli pGEM-7Zf (+) DNA, akma favipiravir-RTP içeren bir 5’Cap1 yapı (Cap 1-pGEM-mRNA) bir viral genomu içeren ham grip virüsü RdRp, ve nükleotidler ile transkript inkübe edildi. Reaksiyon ürünleri daha sonra elektroforezlendi. Şerit 1-5: Capl-pGEM-mRNA ve ham enzim çözeltisi + 50 umol / L CTP; Şerit 2, 3: Şerit 1 + 100 ve 1,000 umol / L GTP koşulları; Şerit 4, 5: Şerit 2 + 100 ve 1,000 umol / L favipiravir-RTP koşulları. (B) Grip virüsü RdRp’nin favipiravir-RTP ile inhibisyonu. 325’Capl yapılı (Cap1-pGEM-mRNA), viral bir genom içeren ham influenza virüsü RdRp ve favipiravir-RTP içeren nükleotitler içeren P-etiketli pGEM-7zf (+) DNA akıtma transkripti inkübe edildi. Reaksiyon ürünleri daha sonra elektroforezlendi. Şerit 1: Cap1-pGEM-mRNA; Şerit 2-6: Cap1-pGEM-mRNA + ham enzim çözeltisi; Şerit 3-6: Şerit 2 + 50 µmol / L CTP koşulları, 100 µmol / L ATP, 50 µmol / L GTP; Şerit 4-6: Şerit 3 + 10, 100 ve 1.000 umol / L favipiravir-RTP koşulları. * Reaksiyon karışımına GTP, ATP ve CTP eklendiğinde uzatılmış RNA tespit edildi.

Ribavirin bir guanozin analogudur ve çok çeşitli RNA virüslerine karşı anti-viral aktiviteye sahiptir. Ribavirin, ribavirin monofosfat (ribavirin-MP) ve ayrıca trifosfat formunu üretmek için hücrelerde fosforilasyona uğrar. Ribavirinin çoklu etki mekanizmaları belgelenmesine rağmen, 17 ) en iyi bilinen, ribavirin-MP tarafından inosin monofosfat dehidrojenazın (IMPDH) inhibisyonu olup, düşük GTP seviyelerine yol açar. 18 ) İMPDH inhibisyonu favipiravir-RMP olan ve% 50 engelleyici konsantrasyon (IC ribavirin-MP, arasında karşılaştırıldı 50 ) değerleri, sırasıyla 601 ve 3.9 umol / L idi. 8 )Ribavirin-MP ile tedavi edilen MDCK hücrelerindeki GTP konsantrasyonu, favipiravir-RMP ile olandan çok daha düşüktü. 19 ) Bu veriler, IMPDH’nin favipiravir için hedef olma olasılığını düşündürmektedir.

Nükleik asit sentezi, virüslerde ve insanlarda yaşam için gereklidir. RNA virüsünün aksine, insanlar RdRp’ye sahip değildir, fakat DNA’ya bağımlı RNA polimeraz (DdRp) ve DNA’ya bağımlı DNA polimeraz içerir. Favipiravir-RTP, bu polimeraz aktivitelerinin inhibisyonu için test edilmiştir. 20 ) Favipiravir-RTP IC olan influenza RdRp inhibe 50 arasında 0.341 umol / L, fakat insan DNA polimerazları 1000 umol / L kadar az, P, y, a değildi. Favipiravir hafif inhibe İnsan RNA IC ile DDRP ait II, Polimeraz 50 905 umol / L. 9 ) Bu sonuçlar, favipiravirin MDCK hücrelerinde 637 µmol / L’de DNA ve RNA sentezini inhibe etmediğine dair kanıtlarla tutarlıdır. 8 )

Hücre içi aktivasyonu ve favipiravir etki mekanizması şematik gösterimi tarihi (Şek. Elde edilen favipiravir bulgularına göre çizilerek (Şekil 4).4 ). Konakçı hücrelere dahil edildikten sonra favipiravir, viral RdRp’yi bloke eden favipiravir-RTP haline gelmek için fosforibosilasyona ve daha fazla fosforilasyona uğrar. Favipiravirin bu etki mekanizması oldukça benzersizdir, çünkü pazarlanan influenza ilaçları virüsün girişini veya salınmasını engeller. Viral RdRp’nin favipiravir tarafından seçici inhibisyonu, daha geniş bir anti-viral spektrumu ima eder. Favipiravir ile RNA virüslerinin anti-viral aktivitesi ve RdRp aktivitelerinin inhibisyonu arasındaki korelasyonu açıklığa kavuşturmak için daha fazla araştırmaya ihtiyaç vardır.

Resim, resim vb. İçeren harici bir dosya. Nesne adı pjab-93-449-g004.jpg

Şekil 4.

Favipiravir aktivasyon mekanizmasının şematik gösterimi (ilgili Furuta göre ve ark. 2013 9 ) ). Favipiravir hücrelere dahil edilir ve konakçı hücre enzimleri tarafından favipiravir ribofuranosil fosfatlara dönüştürülür. Trifosfat formu, favipiravir-RTP, influenza viral RNA polimeraz aktivitesini inhibe eder.

3. Favipiravirin anti-viral aktiviteleri

Favipiravirin RNA virüslerinin proliferasyonunu inhibe ettiği fakat DNA virüslerini inhibe etmediği gösterilmiştir. 21 ) in vitro yayınlanan çalışmalar, Tablo içinde kayıtlı gelen favipiravir anti-viral etkinlikleri belirtilen Tablo11 .

Tablo 1.

Favipiravirin in vitro anti-viral aktiviteleri

grup Aile Virüs EC 50 (g / mL) Referans
RNA (-) dizisi Orthomyxovırıdae İnfluenza A (mevsimsel) 0,01-0,94 Furuta, Y. ve diğ. 2002 21 ) Sleeman, K. ve ark. 2010 22 )
İnfluenza A (H5N1) 0,2-1,9 Sidwell, RW ve diğ. 2007 25 ) Sleeman, K. ve diğ. 2010 22 )
Grip A (H1N1) pdm09 0,13-3,53 Sleeman, K. ve ark. 2010 22 )
İnfluenza A (H7N9) 1.4 Watanabe, T. ve diğ. 2013 61 )
Grip B 0,04-0,8 Furuta, Y. ve diğ. 2002 21 ) Sleeman, K. ve ark. 2010 22 )
Grip C 0,03-0,06 Furuta, Y. ve diğ. 2002 21 )
Bunyaviridae La Crosse 5 Gowen, BB ve diğ. 2007 29 )
Punta Toro 8,6-30 Gowen, BB ve diğ. 2007, 2010 29 , 34 )
Rift Valley ateşi 4,2-5,0 Gowen, BB ve diğ. 2007, 2010 29 , 34 )
Sandfly ateşi 4,7-18 Gowen, BB ve diğ. 2007, 2010 29 , 34 )
Dobrava 15 Buys, KK ve diğ. 2011 35 )
Maporal 10 Buys, KK ve diğ. 2011 35 )
Kırım-Kongo kanamalı ateşi 1.1 Oestereich, L. ve diğ. 2014 36 )
Prospect Hill 10 Buys, KK ve diğ. 2011 35 )
Şiddetli ateş trombositopeni sendromu 0,71-1,3 Tani, H. ve diğ. 2016 41 )
arenavıridae Junin 0,8-3,0 Gowen, BB ve diğ. 2007, 2010 29 , 34 ) Mendenhall, M. ve diğ. 2011 31 )
Pichinde 0,9-3,9 Gowen, BB ve diğ. 2007, 2010 29 , 34 )
Tacaribe 0,9-4,1 Gowen, BB ve diğ. 2007, 2010 29 , 34 )
Guanatiro 2.4 Mendenhall, M. ve diğ. 2011 31 )
Machupo 2.2 Mendenhall, M. ve diğ. 2011 31 )
Lassa 1.7–11.1 (EC 90 ) Safronetz, D. ve diğ. 2015 32 ) Oestereich, L. ve diğ. 2016 33 )
Fılovıridae Ebola 10.5 Oestereich, L. ve diğ. 2014 53 ) Smither, SJ ve diğ. 2014 54 )
Rhabdoviridae Kuduz 5,1-7,0 Yamada, K. ve diğ. 2016 58 )
Paramyxovırıdae İnsan metapneumovirus 1,3–6,3 (EC 90 ) Jochmans, D. ve diğ. 2016 60 )
Solunum sinsityal virüsü 41 Furuta, Y. ve diğ. 2002 21 )
RNA (+) dizisi Flaviviridae Batı Nil 53 Morrey, JD ve diğ. 2008 44 )
Sarıhumma 42 Julander, JG ve diğ. 2009 43 )
zika virüsü 3,5-3,8 Zmurko J. ve diğ. 2016 45 )
Togavırıdae Batı at ensefaliti 1.2, 49 (EC 90 ) Delang, L. ve diğ. 2014 47 ) Julander, JG ve diğ. 2009 46 )
Venezüella at ensefaliti 1.7 Delang, L. ve diğ. 2014 47 )
Doğu at ensefaliti 2.8 Delang, L. ve diğ. 2014 47 )
Barmah ormanı 2.8 Delang, L. ve diğ. 2014 47 )
Ross Nehri 0.5 Delang, L. ve diğ. 2014 47 )
Mayaro 2.5 Delang, L. ve diğ. 2014 47 )
Chikungunya 0,3-9,4 Delang, L. ve diğ. 2014 47 )
Pıkornavırıdae çocuk felci 4.8 Furuta, Y. ve diğ. 2002 21 )
Gergedan 23 Furuta, Y. ve diğ. 2002 21 )
Enterovirus 71 23 Wang, Y. ve diğ. 2016 50 )
Kalısıvırıdae Noro 19-39 Rocha-pereira, J. ve diğ. 2012 51 )

3.1. İnfluenza virüsü üzerindeki etkiler.

Favipiravir% 50 etkili konsantrasyon ile grip virüsü laboratuar suşları kullanılarak çalışmalarda tip A, B ve C (EC grip virüsü suşunun her alt tipi, karşı anti-viral aktivitesini göstermiştir 50 ) 0.014 ug / mL ila 0.55 arasında değişen değerler. 21 ) Favipiravir, mevsimsel suşlar A (H1N1), A (H1N1) pdm09, A (H3N2) ve B dahil temsili grip virüslerinin proliferasyonunu bloke etme kabiliyeti açısından in vitro olarak değerlendirildi ; insandan izole edilen yüksek derecede patojenik kuş gribi virüsü A (H5N1). Bu suşlar, oseltamivir veya zanamivire dirençli olanları ve her iki NA inhibitörüne karşı dirençli olanları içerir. (Res favipiravir test edilen tüm sarmalların karşı anti-viral aktivitesini göstermiştir belirtilmelidir.(Şekil5 ). 22 )Favipiravir% 50 sitotoksik konsantrasyon (CC olan MDCK hücreleri için sitotoksik değildi50):> 1000 ug / mL, yüksek antiviral endeksi gösteren. 21 )

Resim, resim vb. İçeren harici bir dosya. Nesne adı pjab-93-449-g005.jpg

Şekil 5.

MDCK hücrelerinin plak indirgeme tahlilinde favipiravir için test grip virüsü duyarlılık (Sleeman dayanarak ve ark. 2010 22 ) ). İnfluenza virüsleri mevsimsel A (H1N1), A (H1N1) pdm09, A (H3N2) ve B suşlarını; insandan izole edilen yüksek derecede patojenik kuş gribi virüsü (H5N1). Bu suşlar, oseltamivir veya zanamivire dirençli olanları ve her iki NA inhibitörüne karşı dirençli olanları içerir. NA’daki değişiklikler sürveyans kriterleri ile tespit edilmiştir (Sheu ve ark. , 2008 59 ) ). AT 50 ,% 50 etkili konsantrasyon. ○; NA inhibitörüne duyarlı, ●; Oseltamivir dayanıklı, ▲; Oseltamivir ve Zamanivir dayanıklıdır.

3.2. Favipiravirin in vivo etkinliği.

Favipiravir influenza virüsü enfeksiyonu (Şek. Murin modellerinde değerlendirilmiştir (Şekil 6).6 ). Farelere, H3N2 (A / Victoria / 3/75), H3N2 (A / Osaka / 5/70) veya H5N1 (A / Ördek / MN / 1525/81) ‘den ölümcül bir dozda influenza virüsü verildi. Favipiravir, enfeksiyondan 1 saat sonra oral yoldan uygulandı. Favipiravir ile dozlanan farelerde günde iki kez (teklif) veya günde dört kez olmak üzere günde 30 mg / kg’dan fazla dozda hayatta kalma oranı önemli ölçüde iyileşirken, kontrol grubunda hiçbir fare hayatta kalamadı. 9 )

Resim, resim vb. İçeren harici bir dosya. Nesne adı pjab-93-449-g006.jpg

Şekil 6.

Farenin enfeksiyon modelinde favipiravir terapötik etkileri (ilgili Furuta göre ve ark. 2013 9 ) ). On dişi Balb / c faresine A / Victoria / 3/75 (H3N2), A / Osaka / 5/70 (H3N2) veya A / Ördek / MN / 1525/81 ( H5N1) ve 21. güne kadar hayatta kalma açısından izlendi. Favipiravir, 5 gün boyunca günde iki kez (Osaka, Duck) veya dört kez (Victoria) enfeksiyondan 1 saat sonra oral yoldan uygulandı. **, kontrol grubuna kıyasla p <0.001 (Yates düzeltmeli Ki-kare testi). ++, p <0.001 kontrol grubuna göre (Kaplan-Meier yöntemi, Log-rank testi).

Favipiravirin viral yük üzerindeki etkisi, influenza virüsü H1N1 (A / California / 04/09) ile enfekte olmuş farelerde araştırıldı. 60 ve 300 mg / kg / gün favipiravir ile oral tedavi, enfeksiyondan 3 ve 6 gün sonra akciğerdeki viral yükü azalttı. Favipiravir, influenza virüsü A (H1N1) pdm09 ile murin enfeksiyon modelinde oseltamivir ve zanamivir’e eşit veya daha güçlü anti-viral etkinlik göstermiştir. 23 ) Ayrıca, influipiravir, influenza virüsleri A / PR / 8 (H1N1) ile 100 kat daha fazla titre veya gecikmeli dozlama (enfeksiyon sonrası 96 saate kadar) ile murin enfeksiyon modellerinde oseltamivirden önemli ölçüde daha etkilidir. A / Duck / MN / 1525/81 (H5N1) bulaşıcı murin modelinde. 24 , 25 )

Anti-viral ajanların farklı bir etki mekanizması ile kombinasyonu, terapötik etkileri arttırmak veya dirençli virüs klonlarının ortaya çıkışını azaltmak için kullanılır. Sinerjistik etkiler, grip virüsünün murin modelinde favipiravir ile oseltamivir kombinasyonuyla gösterilmiştir. 26 ) Favipiravir ve oseltamivir kombinasyonu, influenza virüsü A / Victoria / 3/75 (H3N2) ile enfekte olmuş farelerin hayatta kalma oranını önemli ölçüde artırırken, tek bir ajandan herhangi biri sınırlı etkiler göstermiştir. İnfluenza virüsleri A / NWS / 33 (H1N1) veya A / Duck / MN / 1525/81 (H5N1) ile enfekte olmuş farelerde benzer kombinasyon etkileri gösterilmiştir. Bu sonuçlar bize mevcut anti-influenza ajanlarına dirençli salgın grip virüsü tedavisi veya ciddi hastalar için daha geniş terapötik seçenekler sunmaktadır.

4. Favipiarvirin diğer virüslerdeki etkinliği

Favipiravir, özellikle RNA virüsleri üzerinde etki yapma özelliğine sahiptir. 21 ) RNA virüslerinin neden olduğu enfeksiyonlar arasında, arena-, bunya-, flavi- ve filovirüsler hemorajik ateşe ve / veya vaka ölüm oranı yüksek ensefalite neden olur. Bu viral enfeksiyonlar için ne aşılar ne de onaylanmış anti-viral ajanlar mevcut değildir, bu da etkili geniş spektrumlu anti-viral ajanlara acil ihtiyaç olduğunu vurgulamaktadır. Ribavirin, arenaviral hemorajik ateş için etkili olan ve etiket dışı kullanılan tek ilaçtır. Terapötik etkileri tarihsel verilerle karşılaştırmaya dayanmaktadır. 27 )

Bir sonraki bölüm, favipiravirin hemorajik ateş virüsleri ve pikol, noro ve kuduz virüsü de dahil olmak üzere ilgili olanlar için etkinliği üzerine gözden geçirmedir.

4.1. Arenavıridae.

Arenavirüslerin çoğunun insanda ciddi hastalıklara neden olduğu bilinmektedir. 28 ) Arvenavirüs enfeksiyonlarının tedavisi için toksiklik endişesi olan ribavirinin yanı sıra hiçbir ajan onaylanmamıştır. Favipiravirin patojenik arenavirüslere karşı in vitro aktivitesi ribavirin ile karşılaştırıldı. AT 50 Vero hücreleri kullanılarak sitopatik etki (CPE), analizde favipiravir ait değerleri 0,79-0,94 ug / mL Junin virüsü, Pichinde virüsü (PICV) ve Takaribe virüsü. 3. gün Vero hücreleri ve 5 enfeksiyondan,% 90 etkili konsantrasyon (EC virüs verim azaltma analizi vasıtasıyla da 90 Lassa virüsü) değerleri (Las V), sırasıyla 1.7 ve 11.1 ug / mL idi. 32 )Buna ek olarak, favipiravir ribavirin (Tablo daha test edilen virüsler için daha yüksek bir seçicilik gösterdi (Tablo 22 ).

Tablo 2.

İn vitro Arenavirüsler karşı favipiravir ve ribavirin inhibisyon etkileri (Gowen dayanarak ve ark., 2007 29 ) )

Virüs a Gerginlik Favipiravir b Ribavirin b
CC 50 EC 50 CC 50 EC 50
JUNV Gizli 1 188 0,79 239 51 2.7 19
PICV Bir 4763 175 0.94 186 38 3.2 12
TCRV TRVL 11573 214 0.94 227 68 2.4 28

bir JUNV, Junin virüsü; PICV, Pichinde virüsü; TCRV, Tacaribe virüsü.

b % 50 sitotoksik konsantrasyon (CC 50 ) ve% 50 etkili konsantrasyon (EC 50 ) değerleri ug içindedir / JUNV, PICV ve TCRV için ml CC olarak hesaplanır Vero hücreleri ve SI (seçicilik endeksi) kullanılarak Wmn tahlilleriyle belirlenen 50 / AT 50 .

PICV ile enfekte hamster modelinde, favipiravir ile oral tedavi ölümleri bastırdı, kan ve dokulardaki viral yükleri azalttı ve enfeksiyondan 4 saat sonra 7 gün boyunca 60 mg / kg / gün teklifinde karaciğerdeki hasarı engelledi. 29 ) Enfeksiyondan 4-6 gün sonra favipiravir uygulaması, PICV enfekte hamster modelinde 7 gün boyunca 100 mg / kg / gün teklifinde sağkalım oranını (P <0.001) önemli ölçüde artırdı. 30 ) PICV enfeksiyonu kobay modelinde, oral favipiravirin terapötik etkileri, semptomlar ortaya çıktıktan sonra bile gösterilmiştir. 31 )

Son zamanlarda oral favipiravirin LASV’nin kobay ve fare enfeksiyonu modellerinde etkili olduğu bildirilmiştir. 32 , 33 ) Tedavi edici etkisi Las V (Şek. 2 gün Enfeksiyondan başlayan dozlama favipiravir ile gösterildi (Şekil 7a).7 A). Favipiravirin günde bir kez 300 mg / kg / gün subkutan tedavisi ateşi düşürdü, vücut ağırlığı kaybını engelledi ve enfekte kobaylarda hayatta kalma oranını artırdı. Bu etkiler, 50 mg / kg / gün ribavirin ile elde edilenlerden daha fazla tezahür etti. Favipiravir tedavisi 5 başlatıldı da Las V, ile enfekte kobaylar hayatta kalma oranını geliştirilmiş, 7 ve 9 gün sonra enfeksiyon (Şek. (Şekil 77 B). 32)

Resim, resim vb. İçeren harici bir dosya. Nesne adı pjab-93-449-g007.jpg

Şekil 7.

Gine domuzlarında ölümcül Lassa virüsü enfeksiyonunun favipiravir ile tedavisi (Safronetz D ve ark. 2015 32 )). (A) Tedavi, mücadeleden 48 saat sonra başladı. Dokuz kobay grubuna ölümcül bir kobay uyarlanmış-Lassa virüsü (GPA-LASV) dozu ile meydan okundu ve iki hafta boyunca günde bir kez favipiravir (150 veya 300 mg / kg / gün), ribavirin (50 mg / kg) ile deri altından tedavi edildi. / gün) veya araç plasebo. (B) Altı kobay grubuna öldürücü dozda GPA-LASV uygulanmıştır. Mücadeleden sonraki 5, 7 ve 9. günlerden başlayarak, ilgili hayvan grubuna favipiravir tedavisi (300 ardışık gün boyunca günde bir kez subkütan olarak 300 mg / kg / gün) başlandı. Her çalışma, enfeksiyondan 42 gün sonrasına kadar hayatta kalmayı izledi. * p <0.05, ** p <0.01, *** p <0.001 plaseboya kıyasla; a; p <0.05 ve b; ribavirin ile karşılaştırıldığında p <0.001.

4.2. Bunyaviridae.

La Crosse virüsü (LACV), Rift Valley ateş virüsü (RVFV), Kırım-Kongo kanamalı ateş virüsü (CCHFV), trombositopeni sendrom virüsü (SFTSV) ve hantavirüs ile şiddetli ateş Bunyaviridae ailesindedir ve hemorajik gibi ciddi hastalıklara neden olur. ateş, trombositopeni ile ateş ve böbrek veya pulmoner sendromlu ateş. İn vitro çalışmada, favipiravir (Tablo ribavirin daha Vero hücrelerinde bu virüslere karşı daha güçlü ve seçici anti-viral aktivitesini göstermiştir (Tablo 33 ). 34 , 35 , 41 ) AT 50 CPE veya odak oluşturma ünitesi (FFU) azaltma deneylerinde LACV, Punta Toro virüsü (PTV), RVFV, Sandfly ateş virüsü, SFTSV ve Dobrava, Maporal ve Prospect Hill Hantavirüsleri için değerler 0.9–30 ug / mL idi.

Tablo 3.

İn vitro Bunyavirüsler karşı favipiravir ve ribavirin inhibisyon etkileri (2007, ve diğ. Gowen dayanarak 29 ) Buys ve ark. 2011 35 ) ve Tani ve diğerleri. 2016 41 ) )

Virüs a Gerginlik Favipiravir b Ribavirin b
CC 50 EC 50 CC 50 EC 50
LACV > 1000 5.0 > 199 877 17 51
PTV Adames > 1000 30 > 33 898 42 21
RVFV MP-12 > 980 5.0 > 196 > 906 13 > 70
SFNV Napoli > 1000 18 > 55 > 729 22 > 33
DOBV Sotkamo 757 15 52 296 18 17
MPRLV HV9021050 753 10 74 256 11 22
PHV MP40 600 10 58 248 5.6 44
SFTSV SPL010 > 157 0.9 > 167 > 157 7.7 > 20

bir LACV; La Crosse virüsü, PTV; Punta Toro virüsü, RVFV; Rift Vadisi ateş virüsü, SFNV; Sandfly ateş virüsü, DOBV; Dobrava virüsü, MPRLV; Maporal virüs, PHV; Prospect Hill virüsü UNV, SFTSV; Trombositopeni Sendromu virüsü ile şiddetli ateş.

b % 50 sitotoksik konsantrasyon (CC 50 ) ve% 50 etkili konsantrasyon (EC 50 ) değerleri şunlardır ug / ml Vero hücreleri ve SI (seçicilik endeksi) kullanılarak Wmn tahlilleriyle belirlenen CC olarak hesaplanmaktadır 50 / EC 50 .

Favipiravir teklifiyle oral tedavi, ölümcüllüğü engelledi, kan ve dokulardaki viral yükleri azalttı ve farelerde ve hamsterlarda PTV enfeksiyon modellerinde hepatik lezyonları bastırdı. 29 , 34 ) Favipiravir teklifiyle oral tedavi, dozlama enfeksiyondan 2 gün sonra başladığında, CCHFV ile enfekte olan farelerde hayatta kalma oranlarını iyileştirdi. 36 ) RVFV ile enfekte olan hamsterlarda oral favipiravir, ölümleri bloke etti ve serumda ve dokularda viral titreyi azalttı. 37 )

Trombositopeni sendromu (SFTS) ile şiddetli ateş, son zamanlarda Çin, Kore ve Japonya’da tanımlanmış olan SFTSV’nin neden olduğu ortaya çıkan viral bir hastalıktır. 38 – 40 ) SFTSV’nin mevsimselliği yıl boyunca, ancak ilkbahar ile sonbahar arasında daha yaygındır. Favipiravir AT ile SFTSV replikasyonunu inhibe 50 0,71-1,3 ug değerleri / ml Vero hücreleri kullanılarak FFU azaltma deneyleri için kullanışlıdır. 41 ) Favipiravirin terapötik etkileri, interferon alfa reseptörleri olmayan farelerde SFTSV enfeksiyon modelinde gösterilmiştir (IFNAR – / –). Favipiravir ile oral tedavi, enfeksiyondan 3 gün sonra 5 gün boyunca günde bir kez 300 mg / kg’da tüm farelerden (P <0.001) hayatta kalırken, enfeksiyondan 4 ve 5 gün sonra başlamak hayatta kalma oranlarını önemli ölçüde arttırdı (P <0.01 ve P < plasebo grubunda (Tablo üzerinde 0.05) (Tablo 4).4 ). Bu klinik öncesi çalışma sonuçları üzerine, Japonya’da SFTS ile ilgili klinik araştırmalar başlamıştır. 42 )

Çizelge 4.

SFTSV içinde favipiravir terapötik etkileri IFNAR enfekte – / – fareler modeli (. Tani dayanarak ve arkadaşları 2016 41 ) )

grup tedavi Tedavi süresi Hayatta kalma oranı hayatta kalan / toplam Maksimum vücut ağırlığı değişimi (%) ortalama ± SS
Kontrol araç gün 0-4 1/10 77.3 ± 8.9
Favipiravir 300 mg / kg / gün gün 1–5 6/6 *** 97.9 ± 4.7
gün 2-6 6/6 *** 88.3 ± 5.1
3-7. gün 6/6 *** 83,3 ± 2,2
4-8 gün 5/6 ** 80.2 ± 4.6
gün 5-9 3/6 * 75.5 ± 4.9

Altı ya da 10 IFNAR – / – her bir gruptaki erkek fareler 1.0 x 10 deri altından aşılandı 6 TCIDso 50 SFTSV bölgesinin (SPL010 suş). Fareler, 300 mg / kg / gün dozunda favipiravir ile tedavi edildi. Enfeksiyondan 1, 2, 3, 4 veya 5 gün sonra tedaviye başlandı. Favipiravir ölüme kadar günde bir kez veya 5 gün boyunca uygulandı. Sağkalım Kaplan-Meier analizi ve GraphPad Prism6 kullanılarak belirlendi. Plasebo grubu sonuçlarına göre anlamlılık belirlendi: ***, P <0.001; **, P <0.01; *, P <0.05. Bağıl ağırlık standart sapmalarla aracı olarak gösterilmiştir (Tani ve ark. 2016 41 ) ).

4.3. Flaviviridae.

Favipiravir, sarı humma virüsü (YFV) ve Batı Nil virüsü (WNV) dahil olmak üzere çeşitli patojenik flavivirüslerin replikasyonunu inhibe etti. 43 , 44 ) Flavivirüs için influenza virüsü ile aynı etkinliği sağlamak için daha yüksek favipiravir konsantrasyonlarına ihtiyaç duyuldu. AT 90 YFV için favipiravir Vero hücreleri kullanılarak bir verim azaltma tahlilinde 51.8 ug / mL idi. 43 ) YFV ile enfekte olmuş hamsterlerde, 8 gün boyunca 200 veya 400 mg / kg / gün favipiravir ile oral tedavi, enfeksiyondan 4 saat önce başlatıldığında ölüm oranını önemli ölçüde azalttı. 43 ) Enfeksiyondan sonraki 2 gün içinde favipiravir ile 400 mg / kg / gün oral tedaviye başlandığında tam koruma sağlandı.

WNV için favipiravirin in vitro ve in vivo anti-viral etkinliği gösterilmiştir. 44 ) Favipiravir bir AT ile Batı Nil Virüsü proliferasyonunu inhibe 50Vero hücrelerinde 53 ug / mL. WNV ile enfekte farelerde, 4 saat subkutan enfeksiyon başlatarak 400 mg / kg / gün teklifinde favipiravir oral uygulaması, on fareden dokuzu mortaliteden korudu (p <0.01) ve 6’da beyin dokularında viral proteinlerin ve RNA’nın ekspresyonunu azalttı enfeksiyondan sonraki günler. Benzer etki ikinci türde de gösterilmiştir. Hamsterler, deri altı enfeksiyonundan 4 saat sonra başlayarak 400 mg / kg / gün teklifinde oral olarak dozlandı. Fareler gibi favipiravir de sağkalım oranını önemli ölçüde iyileştirdi (p <0.01). Enfeksiyondan sonraki 7. günde incelendiğinde favipiravir ile dozlanan hamsterlerin beyinlerinde WNV zarf proteininin tespit edilmediğine dikkat edilmelidir.

Zika virüsü (ZIKV) , çoğunlukla sivrisinek ısırıkları tarafından bulaşan Flaviviridae’nin ortaya çıkan bir arbovirüsüdür . Bugüne kadarki kanıtlar fetal enfeksiyon ve mikrosefali arasındaki ilişkiyi göstermektedir. Favipiravir AT ile Vero hücrelerinde ZIKV replikasyonunu inhibe 50 ZIKV enfeksiyonu için terapötik bir potansiyeli göstermektedir, 3.5-3.8 ug / ml. 45 )

4.4. Togavırıdae.

Favipiravir, Vero hücrelerinde kültürlenen EC 90 değeri 49 ug / mL olan Western at ensefalit virüsüne (WEEV) karşı anti-viral aktivite gösterdi . 46 ) WEEV ile enfekte olmuş farelerde, favipiravir ile oral tedavi, hayatta kalma oranını (p <0.01) ve enfeksiyondan 4 saat önce başlayarak 7 gün boyunca 400 mg / kg / gün teklifinde uzatılmış ölüm süresini önemli ölçüde iyileştirdi. Enfeksiyondan sonraki 4. günde beyindeki viral titre istatistiksel olarak anlamlı olmamakla birlikte onda birine düşmüştür. Favipiravir tarafından ortadan kaldırılmayan hastalık belirtileri nispeten mütevazı idi.

Favipiravir AT ile Vero hücrelerinde Chikungunya virüsü (CHIKV) karşı anti-viral etkinlik gösteren 50 arasında 0,3-9,4 ug / mL. CHIKV ile enfekte olmuş farelerde, favipiravir’in oral uygulaması, enfeksiyondan 24 saat önce veya 4 saat sonra başlayarak 300 mg / kg / gün teklifinde hayatta kalma oranını geliştirdi. 47 )

4.5. Pıkornavırıdae.

Ayak-ve-ağız hastalığı virüsünün replikasyonu favipiravir ile inhibe edilmiştir , in vitro bir EC 50 , 14 ug / mL. 48 , 49 ) Favipiravir EC ile HeLa hücrelerinde Vero hücreleri ve rinovirüs içinde poliovirüs replikasyonunu bloke 50 4.8 s, 23 ug / mL, ve sırası ile seçicilik 29 endeksi ve> 43 ile. 21 ) Enterovirüs çoğaltma, EC favipiravir ile inhibe edilmiştir 50 23 ug / ml. 50 )

4.6. Kalısıvırıdae.

Favipiravir AT murin norovirusa karşı aktif olan 50 ug / mL CPE deneyi kullanılarak kemirgen lösemi makrofaj RAW 264.7 hücreleri 39 arasında. PCR, bu favipiravir ortaya gerçek zamanlı bir AT, viral RNA sentezini inhibe 50 19 ug / mL. 51 ) Kalıcı norovirüs enfekte murin modelinde, favipiravir ile oral tedavi, dışkıda viral titreyi ve enfeksiyondan 4 hafta sonra 8 hafta boyunca 600 mg / kg / gün teklifinde norovirüs antijen pozitif farelerin oranını önemli ölçüde azalttı. 14 ) Favipiravir-RTP’nin insan Norovirüsünün RNA polimeraz aktivitesini inhibe ettiği gösterilmiştir. 52 )

4.7. Fılovıridae.

Favipiravir AT Vero E6 hücreleri Zaire Ebola virüsü (Mayinga 1976 suşu) karşı anti-viral etkinlik gösteren 50 10.5 ug / mL. Mayinga 1976 suşu ile enfekte IFNAR – / – C57BL / 6 farelerinde, favipiravir ile oral tedavi, tüm fareleri ölümden korudu ve enfeksiyondan 6 gün sonra 8 gün boyunca kandaki 300 mg / kg / gün teklifinde viral titreyi azalttı. tüm fareler plasebo grubunda öldü. 53 ) Benzer şekilde, E718 suşu ile enfekte olmuş IFNAR – / – A129 farelerinde, favipiravir ile oral tedavi, enfekte olmuş fareleri, enfeksiyondan 1 saat sonra başlayan 14 gün boyunca 300 mg / kg / gün teklifinde ölümlerden tamamen korumuştur. 54 )

2014 yılında batı Afrika’da Ebola virüsü hastalığı (EVD) patlak verdi. Fransız Sağlık ve Tıbbi Araştırma Enstitüsü (INSERM) ve Gine Hükümeti favipiravir (JIKI çalışması) ile klinik çalışma yürüttü.  Favipiravir iyi tolere edildi ve düşük viral yükü olan hastaların mortalitesini azaltma eğilimi gösterdi (döngü eşiği <20).  Çinli grup geçtiğimiz günlerde favipiravirin sağkalım oranını istatistiksel anlamlılık ile arttırdığını (p <0.05) ve Sierra Leone’de EVD olan hastalarda viral yükü azalttığını bildirmiştir.

4.8. Rhabdoviridae.

Son zamanlarda favipiravir EC murin nöroblastoma Nöro-2a hücrelerinde kuduz virüsü (RABV) karşı aktif olduğu bildirilmiştir 50 5.1-7.0 arasında s ug / mL.  Favipiravir, 7 gün boyunca 300 mg / kg / gün teklifinde oral uygulama, enfeksiyondan 1 saat sonra başlatıldığında, RABV ile enfekte olan farelerin morbiditesini ve mortalitesini önemli ölçüde iyileştirdi. Favipiravir, semptomlar ortaya çıktıktan sonra uygulandığında hiçbir etki göstermedi.

Bu sonuçlar, favipiravirin RNA virüsleri arasında geniş bir anti-viral spektrum yelpazesine sahip olduğunu ve özellikle tedavi edilemeyen viral enfeksiyonlar için tıbbi ihtiyaçları karşıladığını göstermektedir. İnterferon a ve ribavirin, geniş bir anti-viral spektrum ile kullanılabilecek olası ilaçlardır; ancak zayıflatıcı yan etkiler kullanımlarını sınırlandırır. Bu ajanların aksine, favipiravir klinik çalışmalarda iyi tolere edilmiştir.

5. Sonuç

Favipiravir, Toyama Chemical Co., Ltd’nin Araştırma Laboratuvarlarında influenza virüsüne karşı fenotipik tarama ile keşfedildi. Etki mekanizmasını ve çeşitli virüs türlerine karşı anti-viral etkileri araştırmak için ileri çalışmalar yaptık. Favipiravir, RdRp tarafından bir pürin nükleotit olarak tanınan ve RdRp enzim aktivitesini inhibe eden aktif bir form olan favipiravir-RTP olmak üzere hücrelerde fosforibosile edilir. Favipiravir-RTP, DNA’ya bağımlı RNA veya DNA polimerazlar üzerinde hiçbir etki göstermez. Bu karakterler, favipiravirin RNA virüsünü DNA virüsü ve memeli hücreleri üzerinde tercih ettiğini açıklar. Favipiravir, mevcut anti-influenza ilaçlarına duyarlı veya dirençli olmasına bakılmaksızın birçok Influenza virüsü tipinde etkilidir. Özel not, favipiravirin çok çeşitli diğer RNA virüslerine karşı aktif olmasıdır.in vitro ve in vivo . İn vitro çalışmalar, favipiravire direnç ortaya çıkmadığını göstermektedir.

Favipiravir şu anda Japonya’da ve ABD’de ileri bir klinik gelişmede influenza enfeksiyonu için onaylanmıştır. Klinik çalışmalardan elde edilen kanıtlar, favipiravirin insanda iyi tolere edildiğini göstermektedir. Favipiravirin daha geniş anti-viral spektrumu bizi Ebola ve SFTS gibi yıkıcı virüs enfeksiyonları için klinik araştırmalara yöneltti. Bu benzersiz profillere sahip favipiavir’in, yakın gelecekte RNA virüsleri tarafından düzeltilmemiş enfeksiyonlar için umut verici bir terapötik ajan olacağına inanıyoruz.

Kaynak :  https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5713175/

 

 

BakBuTREND

BakBuTREND en güncel bilgi platformu

Bir cevap yazın

E-posta hesabınız yayımlanmayacak. Gerekli alanlar * ile işaretlenmişlerdir

This site uses Akismet to reduce spam. Learn how your comment data is processed.